گزارش کارآموزی تهیه واکسن در مؤسسه راضی

دسته بندي : علوم پزشکی » پزشکی
گزارش کارآموزي تهيه واکسن در مؤسسه راضي در 70 صفحه ورد قابل ويرايش


فهرست مطالب

عنوان صفحه

فصل اول

تاريخچه موسسه رازي.......................................................................................... 2

تحقيق و توليد : تشخيص........................................................................................ 3

تعليم و توسعه.......................................................................................................... 4

جايگاه بين المللي..................................................................................................... 5

معرفي فرآوردهاي مصرفي پزشکي................................................................... 6

معرفي واکسن هاي مصرف دامپزشکي.............................................................. 7

معرفي داروي ضد انگلي دام................................................................................. 8

معرفي پادگانها و ساير فرآورده هاي بيولوژيک.............................................. 8

معرفي توبر کولين ................................................................................................. 9

قسمت فيزيکوشيمي................................................................................................ 9





فصل دوم

تاييد مواد اوليه

تعيين آمينو نيتروژن آزاد

تست تعيين تيپ شيشه

اندازه گيري مقاومت هيدروکسي پودر شيشه

آشنايي و کنترل درپوش هاي لاستيکي مخصوص

تهيه محلول استاندارد آمونيوم ppm 5/2

تهيه محلول استاندارد آمونيوم ppm 1

تهيه محلول استاندارد پتاسيم تترايد و مرکورات قليايي

تهيه محلول A براي تست هاي کنترل درپوش

اندازه گيري ميزان آلومينيوم موجود در درپوش

اندازه گيري شفافيت و رنگ محلول



فصل سوم

تعيين مقدار پروتئين

تهيه محلول مينراليزاتور جهت تعيين ازت پروتئين

تهيه سود 1 نرمال جهت تعيين ازت پروتئين

تهيه اسيد بوريک 2% جهت تعيين ازت پروتئين

تهيه معرف جهت تعيين ازت پروتئين

تهيه اسيد سولفوريک جهت تعيين ازت پروتئين

تهيه ازت پروتئين جهت نمونه هاي توبرکولين گاوي

محاسبه نمونه هاي توبر کولين

تهيه TCA 100%



فصل چهارم

تهيه واکسن............................................................................................................ 12

ياورهاي ايمني....................................................................................................... 14

تاريخچه.................................................................................................................. 14

تعريف ياور و کاربرد ياور................................................................................. 15

عملکرد ياورها....................................................................................................... 16

خصوصيات يک ياور مناسب.............................................................................. 20

انواع ياورها........................................................................................................... 21

تقسيم بندي ياورها............................................................................................... 21

تست فرمالين......................................................................................................... 28

روش کار............................................................................................................... 28

تست آلومينيوم...................................................................................................... 29

تهيه محلولهاي استاندارد آلومينيوم.................................................................. 29

اندازه گيري آلومينيوم موجود در نمونه هاي واکسن.................................... 31

تست تيرمرسال..................................................................................................... 33

تهيه محلول دي تيزون.......................................................................................... 34

تهيه محلول تست آمونياک................................................................................... 35

روش اندازه گيري مرتيولات............................................................................... 35

فصل پنجم

تهيه سرم................................................................................................................ 37

تست اندازه گيري فنل.......................................................................................... 40

تهيه محلول آمينو فنازن....................................................................................... 40

تحليه محلول پتاسيم هگزاسيانوفلات................................................................. 40

تهيه بافر بورات..................................................................................................... 41

اندازه گيري فنل در سرم ديفتري...................................................................... 41

آلبومين .................................................................................................................. 42

تهيه سرم فيزيولوژي........................................................................................... 55

آماده سازي نمونه هاي توکسوئيد.................................................................... 55

آماده سازي نمونه هاي آنتي ژن....................................................................... 56

آماده سازي نمونه هاي سرم يا پلاسما........................................................... 57

فصل ششم

دستگاه uv-vis-spectroscopy

دستگاه رطوبت سنج

مقدمه لئوفيليزاسيون

تاريخچه لئوفيليزاسيون

بررسي اجمالي يک چرخه لئوفيليزاسيون

کنترل کيفيت لئوفيليزاسيون

انبار و ذخيره محصول

دستگاه pH متر

ترازوي ديجيتالي






فصل اول

تاريخچه مؤسسه رازي

آشنايي با قسمت فيزيکوشيمي


تاريخچه

مؤسسه تحقيقات واکسن و سرم سازي با بيش از 75 سال سابقه فعاليت يکي از قديمي ترين و معتبرترين مراکز علمي و تحقيقاتي کشور شناخته مي شود.

اين مؤسسه فعاليت خود را در سال 1304 تحت وزارت فلاحت و فوائد عامع (وزارت کشاورزي وقت) با تحقيقات پيرامون راههاي مبارزه با بيماري خانمانسوز طاعون گاوي که با تلف صدها هزار رأس گاو حيات دامي کشور را مورد تهديد قرار داده بود آغاز مرد و پس از مدت کوتاه با توليد و عرضه واکسن مؤثر عليه بيماري مبور دوره نويني از مبارزه عليه بيماريها را در کشور پايه گذاري نمود.

به فاصله کوتاهعي پس از اين موفقيت کاربر روي توليد واکسنهاي مؤثر عليه بيماريهاي مهلک دامي از قبيل سياه زخم نيز آغاز شد و از سال 1320 تحقيق و توليد انواع واکسنها و سرمهاي ممصرف پزشکي در دستور کار مؤسسه تحقيقات رازي قرار گرفت.

مسئله اي که حائز اهميت مي باشد اين است که دوران شکوفائي و رشد و توسعه مؤسسه تحقيقات رازي مربوط به دوران پس از واگذاري مديريت مؤسسه به متخصصان داخلي در سال 1329 مي باشد و خوشبختانه بخش عمده اي از واکسنها و ديگر فرآورده هاي بيولژيک در اين سالها مورد تحقيق و توليد قرار گرفته اند.

در سالهاي پس از انقلاب اسلامي روند فعاليت ها در مؤسسه تحقيقات رازي از لحاظ کمي و کيفي گسترش چشمگيري پيدا کرد بطوريکه تحقيق و توليد زايدي از واکسنهاي دامي و انساني از جمله واکسنهاي اوريون، سرخجه و سه گانه (سرخک، سرخجه، اويون) در اين سالها انجام گرفت.



تحقيق

در سالهاي اخير فعاليتهاي گسترده اي براي تحقيق و توليد انواع مختلفي از واکسنهاي نصرف انساني، دام و طيور تداوم پيدا کرده و به يمن تلاشهاي تعداد زياد از متخصصان و دانشمندان کشورمان قابليت هاي علمي و تحقيقاتي مؤسسه از شهرت جهاني برخوردار شده است.

توليد

با توجه به برنامه ريزي گسترده جمهوري اسلامي ايران براي مقابله با بيماري هاي انسان، دام و طيور مؤسسه رازي توليد انواع واکسنها و آنتي ژنها را در دستور کار خود قرار داده است. واکسنهاي جديد عليه بيماري لپتوسپيروز و اوريون و برخي آنتي ژنها از قبيل لکتين، گامبور، نيوکاسل روغني طيور و واکسن آنفلونزاي روغني طيور توليد شده است.



تشخيص

در حال حاضر معاونت تشخيص مؤسسه با در اختيار داشتن آزامايشگاههاي مجهز در زمينه تشخيص بيماريها ميکروبي و ويروسي تشخيص پاتولژي و انگل شناسي و همچنين تشخيص بيماريهاي آزيان، زنبور عسل و کرم ابريشم خدمات بيشماري را به سازمان دامپزشکي و مراکز تحقيقاتي و دانشگاه ها ارائه مي دهد.



تعليم

مؤسسه رازي با بهره گيري از تعداد قابل توجهي اعضاي هيئت علمي و يک سلسله امکانات فني و تجهيزاتي گسترده و کمياب بسيار خوبي براي برگزاري دوره هاي آموزش ضمن خدمات و دوره هاي مقطع دار برخوردار است. همچنين تعدادي دانشجوي دوره هاي فوق ليسانس در رشتهخ هاي ويروس شناسي و باکتري شناسي در مؤسسه مشغول به تحصيل هستند.



توسعه

در حال حاضر مؤسسه رازي بر روي توليد واکسن برخي بيماري هاي انساني از جمله واکسن هموفيلوس واکسن آنفولونزا، واکسن آسلولار، سياه سرفه مصرف انساني و واکسن نوترکيبي تب برفکي دام و توليد انواع آنتي ژن ها و کيت هاي تشخيصي آزمايشگاهي گامهاي بلندي در جهت بهره گيري از بيوتکنولوژي که بعنوان يکي از پنج علم برتر جهان محسوب مي شود، برداشته است.



جايگاه بين المللي

مؤسسه تحقيقات واکسن و سرم سازي رازي ساليانه بيش از سه ميليارد (دز) انواع فرآورده هاي بيولوژيک از جمله واکسن و سرمهاي مختلف مصرف پزشکي، دامپزشکي و آنتي ژن هاي تشخيص آزمايشگاهي به عنوان يکي از بزرگترين مؤسسات نوع خود در جهان و بي نظير در سطح خاورميانه شناخته مي شود.

اين مؤسسه داراي ارتباطات گسترده با مجامع شناخته شده بين المملي از جمله سازمانهاي بهداشت و خواربار جهاني مي باشد و از سوي دفتر مبارزه با بيماريهاي واگير دامي (مستقر در پاريس) به عنوان آزمايشگاه مرجع بين المللي براي تشخيص برخي از بيماريها از جمله آبله بزي، آبله گوسفندي و طاعون گاوي معرفي شده است. اين مسئله نشان بارزي از اهميت جايگاه مؤسسه تحقيقات رازي در عرصه بين المللي مي باشد. در حال حاضر کتابخانه و مراکز اسناد علمي و تحقيقاتي مؤسسه رازي به عنوان يک کتابخانه مرجع تخصصي در زمينه بيماريهاي انسان، دام و طيور که داراي حدود هجده هزار جلد کتاب ارزشمند و ده ها هزار مجله و ژورنال خارجي است، که از اکثر مراکز علمي و تحقيقاتي معتبر جهان جمع آوري مي گردد با فراهم آوري و سازماندهي منابع و بکارگيري سايت اينترنت و بانکهاي اطلاعاتي جهان و تبادل اطلاعات با مراکز علمي و معنبر بين المللي الز جمله WHO , OIE, FAO, UNICEF, UNESCO نسبت به فراهم آوري آخرين منابع اطلاعاتي روز و تکنولوژي هاي پيشرفته نقش بسزايي در تأمين اطلاعات علمي و ارتباطات محققين و پژوهشگران مؤسسه رازي و ساير مراکز علمي و تحقيقاتي کشور را ايفا مي نمايد.



فرآورده هاي مصرف پزشکي

.اکسن فلج اطفال

واکسن سرخک

واکسن اوريون (ضد گوشک)

واکسن ام ام آر (سرخک، سرجه، اوريون)

واکسن دوگانه (ضد ديفتري، کزاز)

براي خردسالات، نوجوانان و بزرگسالان

واکسن سه گانه (ثلالث)

ضد ديفتري، کزاز و سياه سرفه

واکسن کزاز

سرمهاي درماني مصرف پزشکي

سرم ضد کزاز

سرم ضد ديفتري

سرم پلي والام ضد عقرب

سرم پلي والان مار



واکسن مصرف دامپزشکي

- شاربن (سياه زخم)

- توام شاربن و کزاز است



MgSO4 – 7H2O

FeSO4 – 7H2O – L – Cystine – L – tyrosine – Uracil – Ca – Pantothinate – Thiamine – Riboflavin – Pyridoxin – Biothin – Distilled Water – NaOH 10 N to PH 7/2-7/3

آنچه که در محيط کشت اهميت زيادي دارد مقدار مواد دماي محيط و ph محيط و فشار است.

بعد از اينکه محيط کشت استريل و در فرمانتور قرار گرفت بذر اوليه که باکتري لئوفيليز شده مي باشد به محيط کشت اضافه مي شود. بعد از گذشت زمان معيني که براي هر باکتري متفاوت است برداشت صورت مي گيرد و محصول که توکسين مي باشد را به گرم خانه برده در دماي 37 الي 40 درجه نگه مي دارند در اين مرحله از ماده اي مانند فرمالين در مورد توکسين ديفتري يا کزاز استفاده مي شود که باعث ميشود توکسين به توکسوئيد تبديل شود بعد از گذشت زماني در حدود 40 روز مثلا براي تهيه واکسن کزاز تصفيه صورت مي گيرد که معمولا از صافي هاي غشايي استفاده مي شود در اينجا لازم است بدانيم واکسن سياه سرفه که در شرايط ميکروبي خاص قرار داشته و در فاز ناخوش زايي مي باشد در محيط کشت مصنوعي رشد نموده و سپس در اثر کهنه شدن در حضور ماده ضد عفوني به نام مرتيولات مرده و مقدار زيادي پادگن محلول از سطح پيکر آنها جدا مي شود و واکسن ضد سياه سرفه را تشکيل مي دهد. دراين مرحله بعد از کنترل روي حيوانات نظير خوکچه هندي بعد از تغليظ بوسيله کروماتوگرافي ستوني ژل سفاوکس به قسمت فرمولاسيون يا mixing مي رسيم در اين مرحله که پس از مطمئن شدن از اينکه توکسين کاملا به توکسئوئيد تبديل شده PH تنظيم شده فرمالين و مرتيولات در رنج دلخواه است. برگشت ناپذيري را در 6 هفته مهلت مي دهيم ايمني بودن را کنترل مي کنيم . در فرمولاسيون براي تهيه هر واکسن موادي متفاوت است در واقع کارهاي نهايي صورت مي گيرد تا مثلا ياور دلخواه به واکسن منتقل شود. درمورد واکسن سه گانه ديفتري ، کزاز ، سياه سرفه مواردي نظير :

ALCI3 – NaOHN/2 – Na2HPO4 – 2H2O – KH2PO4

Sodium acetate.3H2O – Sodium acedium acetate anhydrouse

NaCL – HCL / NaOH to PH 6/8

تست فرمالين

تست فرمالين يکي از آزمايشات مربوط به واکسن ها در بخش فيزيکوشيمي مي باشد دراين آزمايش مقدار فرمالين موجود در واکسن توليد شده را بدست مي آورند فرمالين ماده اي است سمي که جهت inactive کردن توکسين و تبديل آن به توکسوئيد واکسن اضافه مي شود.

اين ماده باعث مي شد خاصيت ايموژنوسيتي تقويت شود و خاصيت پاتوژنوسيتي از بين رود.

چون اين ماده سمي مي باشد تست اندازه گيري مقدار آن در واکسن ضروري مي باشد.

روش کار :

1- به يک ميلي ليتر از نمونه رقيق شده مقدار 4 ميلي ليتر آب و 5 ميلي ليتر معرف استيل استون R1 اضافه کنيد.

2- نمونه ها را در حمام 40 درجه گرم کنيد و اجازه دهيد براي مدت 45 دقيقه باقي بماند.

3- يک محلول رفرانس تهيه کنيد با استفاده از يک محلول شامل 002% درصد وزني به حجمي فرمالدهيد CH2O که در حد رقت واکسن تهيه شده است.

4- رنگ محلول نبايد از رنگ محلول رفرانسي شديدتر باشد.

5- جذب نمونه ها را در 410 نانومتر دستگاه اسپکترومتر بخوانيد.

تهيه استيل استون R1 : به 100 ميلي ليتر از محلول آمونيوم استات مقدار 2 ميلي ليتر از استيل استون بيافزائيد.

تهيه محلول آمونيوم استات : مقدار 150 گرم از آمونيوم استات را در آب حل کنيد و مقدار 3 ميلي ليتر اسيد استيک غليظ به آن اضافه کنيد و محلول را به حجم 100 برسانيد.